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流式細(xì)胞儀是一種可以對細(xì)胞進(jìn)行自動分析和分選的裝置,具有快速測量、性能穩(wěn)定、使用靈活、可靠性高等優(yōu)點,在生物、醫(yī)學(xué)、科研、微生物等領(lǐng)域中都有一定的應(yīng)用。今天我們主要來介紹一下流式細(xì)胞儀的主要參數(shù),希望可以幫助到大家。
流式細(xì)胞儀的主要參數(shù)
指標(biāo)
為了表征儀器性能,往往根據(jù)使用目的和要求而提出幾個技術(shù)參數(shù)或指標(biāo)來定量說明。對于流式細(xì)胞儀常用的技術(shù)指標(biāo)有熒光分辨率、熒光靈敏度、適用樣品濃度、分選純度、可分析測量參數(shù)等。
熒光分辨率
強(qiáng)度一定的熒光在測量時是在一定道址上的一個正態(tài)分布的峰,熒光分辨率是指兩相鄰的峰可分辨的zui小間隔。通常用變異系數(shù)(C.V值)來表示。C.V的定義式為:
C.V=σ/μ
式中,σ為標(biāo)準(zhǔn)偏差,μ是平均值。
在實際應(yīng)用中,我們使用挖關(guān)系式σ=0.423FWHM;其中FWHM為峰在峰高一半處的峰寬值?,F(xiàn)在市場上儀器的熒光分辨率均優(yōu)于2.0%。
熒光靈敏度
反映儀器所能探測的zui小熒光光強(qiáng)的大小。一般用熒光微球上所標(biāo)可測出的FITC(fluorescein isothiocyanate 異硫氰基熒光素)的zui少分子數(shù)來表示?,F(xiàn)在市場使用儀器均可達(dá)到1000左右。
分析速度/分選速度
儀器每秒種可分析/分選的數(shù)目。一般分析速度為5000~10000;分選速度掌握在1000以下。
樣品濃度